除流行病学及临床特点支持外，从大便中发现O157∶H7大肠埃希杆菌及其毒素才能确诊，其鉴定方法有：

    1.细菌培养分离 提高大便培养阳性率就能提高确诊率，影响培养的因素，主要是大便性状、病程及培养基的选择。血性便、病程短者，阳性率高；水样便、病程长，尤其超过7天者，阳性率低。山梨醇-麦康凯琼脂(SMAC)培养基可提高阳性率。SMAC培养基可作为对O157∶H7之筛选培养基。在SMAC培养基上，O157∶H7菌落无色，而发酵菌株呈粉红色，但有半数EPEC菌株有类似O157∶H7之特性，应注意EPEC与EHEC之鉴别。

    2.免疫学检测 用单克隆抗体直接ELISA反应检测O157∶H7大肠埃希杆菌。

    3.基因检测 应用EHEC特异性DNA探针检测，其敏感性、特异性均可达99%;或应用PCR对EHEC DNA序列分析，其溶血素AB基因为EHEC特有，特异性强，敏感快速，3～4小时可出结果。其他尚有对SLT1、SLT2两对寡核苷酸引物同时扩增的多重PCR法，但尚未在临床广泛应用。基因检测可用于临床研究与流行病学调查。

　　应与其他大肠埃希杆菌肠炎相鉴别。