中和试验是病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力的试验方法。
(1)简单定性中和试验 本法主要用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。先根据病毒易感性选定试验动物(或鸡胚、细胞培养)及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度(约100 LD50~1 000 LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青霉素、链霉素各200~1 000单位),或用细菌滤器过滤,与已知的抗血清(适当稀释或不稀释)等量混合,并用正常血清加稀释病料作对照。混合后置37℃1h,分别接种实验动物,每组至少3只。分别隔离饲喂,观察发病和死亡情况。对照动物死亡,而中和组动物不死,即证实该病料中含有与该抗血清相应的病毒。本法亦可用于毒素(如毒毒素)的鉴定和分型。
(2)固定血清稀释病毒法 本法多将病毒作10倍递增稀释,分置2列试管,第一列加正常血清(对照组),第二列加待检血清(试验组)。混合后,置37℃作用1h,将各管混合液分别接种选定的试验动物,每一稀释度用3~5只动物。接种后,逐日观察,并记录其死亡数,观察结束后,计算LD50和中和指数,本法适用于大量检样的检测。