简介:乳酸脱氢酶(LDH或LD)是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一,可催化丙酮...[展开]
简介:乳酸脱氢酶(LDH或LD)是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一,可催化丙酮酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应,也可催化相关的α-酮酸。LDH广泛存在于人体组织中,以心、肾、骨骼肌含量最高,肝、脾、胰和肺组织次之。LDH测定方法主要有比色法和连续监测法。[收起]
血清乳酸脱氢酶测定常用诊断心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤。异常情况:1.心肌梗死:若LDH增高后恢复迟缓,或在病程中再次增高,提示梗死范围扩大,预后不良。2.肝脏疾病:急性肝炎或慢性活动性肝炎LDH常显著或中度升高。其敏感度略低于ALT。肝癌时LDH活性明显升高,尤其是转移性肝癌增高更显著。3.血液病:白血病、巨幼红细胞贫血、恶性淋巴瘤等LDH活性升高。4.其他:营养不良、横纹肌损伤、胰腺炎、肺梗塞等LDH活性也升高。
1.比色法:按表1操作。 混匀,室温放置5min后,在440nm波长,比色杯光径1.0cm,蒸馏水调零点,读取各管吸光度,以AU-AC之差值查标准曲线,求出LDH活力单位。 附注: ①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物,但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应。而乳酸锂为固体,稳定,易于称量。 ②除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率。 ③比色应在5~15min内完成,否则吸光度降低。 ④结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数。
2.连续监测法:各实验室可根据本室生化自动仪型号及说明书操作。主要参数为340nm波长,37℃,吸样量500μl,连续监测时间60s,标本与试剂体积之比为1∶50。