简介:尿素(Urea,ure)是哺乳动物蛋白质分解代谢的终产物。在肝脏通过鸟氨酸...[展开]
简介:尿素(Urea,ure)是哺乳动物蛋白质分解代谢的终产物。在肝脏通过鸟氨酸循环合成,主要由肾脏排泄。由于尿素的分子量小又易于溶解,扩散力极大,故脑脊液、浆膜腔积液、唾液、汗液中的尿素浓度基本一致。血尿素浓度主要受肾功能和蛋白质摄入量和分解代谢情况的影响。目前临床实验室测定尿素最常用的方法有二乙酰-肟法,酶偶联速率法。[收起]
血尿素浓度主要反映肾功能和蛋白质摄入量和分解代谢情况的影响。在肝脏通过鸟氨酸循环合成,主要由肾脏排泄。由于尿素的分子量小又易于溶解,扩散力极大,故脑脊液、浆膜腔积液、唾液、汗液中的尿素浓度基本一致。
二乙酰-肟法:1.试管分别标明空白管“B”、测定管“U”、标准管“S”。
2.分别于测定管加血浆(清)20μl,标准管加标准应用液20μl,空白管加蒸馏水20μl。
3.各加酸性试剂3ml、二乙酰-肟试剂3ml。
4.充分混匀,煮沸加热10min,取出、冷却。
5.520nm波长,空白管调零比色、读取标准管及测定管吸光度。附注:①该法最常出现的问题是试剂失效或反应系统被污染。试剂中最不稳定的是NADH和谷氨酸脱氢酶。在分析过程中应注意以下几个方面:如用血浆则不能用含氟化合物或NH4的抗凝剂,前者可抑制尿素酶活性,后者则可参与反应。②试剂空白吸光度应大于1.2A,否则说明NADH被氧化。同种试剂、仪器,在分析条件不变的情况下,测定得F值应相对恒定,否则说明试剂失效。 ③复溶试剂勿振动,以免酶变性失活。必须用无氨水复溶试剂。试剂杯、样品杯、反应杯要无氨、洁净、无酸碱污染,应每次定标,并跟测质控血清。