简介：IL-8是一种低分子量(6～8kD)的多肽，单核细胞、淋巴细胞、纤维母细胞、...[展开]
简介：IL-8是一种低分子量(6～8kD)的多肽，单核细胞、淋巴细胞、纤维母细胞、内皮细胞等多种细胞受LPS、TNF或IL-1刺激后都可产生这种细胞因子。IL-8的特征性生物效应是趋化和激活中性粒细胞，因而参与中性粒细胞介导的组织损伤。在许多慢性炎症性疾病，如类风湿性关节炎、银屑病等，病变局部或血清IL-8产生异常，定量检测IL-8对于研究这些疾病的发生、发展及指导治疗均有重要意义。[收起]
血清白细胞介素8对许多慢性炎症性疾病的诊断有意义。在许多慢性炎症性疾病，如类风湿性关节炎、银屑病等，病变局部或血清IL-8产生异常，定量检测IL-8对于研究这些疾病的发生、发展及指导治疗均有重要意义。
(1)包被兔抗人IL-8IgG(1μg/ml)，以碳酸盐缓冲液稀释，加入酶标板各孔中，50μl/孔。
4℃过夜。
(2)封闭 用洗液(PBS-0.05% Tween20)洗板3次，加入封闭液(含2%牛血清白蛋白的PBS)200μl/孔，37℃2h。
(3)加样 加入待检样品和系列稀释的rIL-8标准品，50μl/孔，所有样品及各稀释度标准品均为复孔或三孔，37℃1h。
(4)洗板3次，加入生物素化兔抗IL-8IgG(35μg/ml)50μl/孔，37℃温育30min。
(5)洗板3次，加入1∶5000稀释的亲和素-HRP，100μl/孔，37℃温育30min。
(6)洗板3次，加入底物液100μl/孔，室温显色5min，每孔加入50μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(7)用酶标仪测A490nm