简介：SIgE的产生部位与SIgA相似，由呼吸道黏膜固有层中的浆细胞产生，分布...[展开]
简介：SIgE的产生部位与SIgA相似，由呼吸道黏膜固有层中的浆细胞产生，分布于黏膜组织及外分泌液中，这些产生部位正是过敏原的侵入门户和过敏反应好发部位。 ELISA的原理是基于抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体保持其免疫学活性，抗原或抗体的酶结合物既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量有直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高，故可极大的放大反应的结果，从而使测定方法达到很高的敏感度。[收起]
痰液中分泌型IgE检查对呼吸道疾病的诊断有辅助意义。支气管哮喘及过敏性肺炎患者，其痰中SIgE含量可增高。
ELISA为多反应、多试剂、多步骤的检验方法，必须严格按照要求细心谨慎操作，否则得不到准确的结果。用于检测不同项目的ELISA操作虽略有差别，但均包括加样、保温、洗涤、比色等步骤，以下叙述各步骤的操作要点。
(1)试剂准备：按试剂盒说明书要求，稀释或配制试验中需要的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜和高质量的。自配的缓冲液应该用pH计测量。从冰箱取出的试验用试剂温度应达到室温后使用。在用HRP作为标记物的试验中，不可用被金属污染的容器。
(2)加样：按要求准备包被好的ELISA板。血清(划体液)标本应该是新鲜采集的或在冰箱中妥善保存的，高度溶血或混浊的标本不宜使用。含叠氮钠作为防腐剂的标本不可用于HRP标记的一步法ELISA。加样时应将标本加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可出现气泡。定量测定中加样量的准确度应达到定量要求。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管，并保持正确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。加酶结合物和加底物的操作和要求与加标本相同。