简介：CD4+/CD8+细胞在免疫应答过程中起着十分重要的调节作用。临床上检测患...[展开]
简介：CD4+/CD8+细胞在免疫应答过程中起着十分重要的调节作用。临床上检测患者外周血中T淋巴细胞亚群或TH/TS比值，有助于了解机体的免疫状态和某些疾病的发病机制和辅助诊断。[收起]
T4/T8比值作用为了解机体的免疫状态和某些疾病的发病机制和辅助诊断。降低：肿瘤、病毒感染、真菌感染、免疫缺陷症。升高：自身免疫性和变态反应性疾病。
(1)直接免疫荧光法 ①取肝素抗凝外周血，用淋巴细胞分层液获得单个核细胞，Hank液配成(1～2)×106细胞/ml。 ②取1ml细胞悬液加入5ml塑料管中，离心2000r/min，2min，弃上清。 ③加FITC-CD4、FITC-CD8各20μl，对照管加mIgG-FITC，4℃反应30min。 ④Hank液洗2次，2000r/min，2min。 ⑤流式细胞计分析。
(2)间接免疫荧光法 ①分离PBMC，调至(1～2)×106细胞/ml。 ②取1ml细胞悬液于5ml塑料管中，离心2000r/min，2min，弃上清。 ③加抗CD4、CD8单克隆抗体各100μl，对照管加抗体稀释液或正常小鼠IgG，4℃反应30min。 ④Hank液洗2次，离心2000r/min，2min，弃上清。 ⑤各加50μl FITC-IgG，4℃反应30min。 ⑥Hank液洗2次，2000r/min，2min。 ⑦滴片，荧光显微镜观察或流式细胞计分析