(1)补体和溶血素的滴定。　　①取补体1ml，加BBS 9ml，依次稀释成1∶20，1∶30，1∶40，1∶50，1∶60，1∶80，1∶100，1∶200，1∶400，同时取50%的溶血素0.2ml，加BBS 9.8ml，即为1∶100的溶血素，然后继续稀释成1∶800，1∶1600，1∶3200，1∶6400。　　②采取方阵排列试管，纵行各管加不同浓度的补体0.1ml，横排各管加溶血素0.1ml(皆应从最高稀释度加起)混匀后，各管加BBS 0.2ml，补体和溶血素对照管各加BBS0.3ml，最后在各管中加2%羊红细胞0.1ml。各管总量为0.5ml，摇匀，放37℃水箱中30min，观察结果。兹举一例说明(表1)：　　以完全溶血的补体和溶血素最高稀释度为各自的单位。　　

1∶3200为一个溶血素单位，补体1∶80为一个补体单位。在实际应用时，溶血素用2u(3200÷2=1600)，补体用2.5u(80÷2.5=32)。　　

(2)正式试验：　　①用V型微量反应板操作，每份标本作一个试验孔，一个血清对照孔。各孔内先加BBS 0.025ml。　　②用稀释棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔，旋转后移入第二孔，共八孔，如此可得1∶2～1∶256稀释。　　

(3)结果判断：凡对照组各管的结果应符合以下情况，否则应重做。　　补体对照管：2.5u=0，1u=0～±，0.5u=3～4。羊红细胞对照管：4。抗体对照管：0。阴性对照管;1∶2～1∶256=0。阳性对照管：同一份阳性血清，每次结果应一致。　　当各测定管反应最强一管仍为±报告可疑，1～4报告阳性。如测定管和血清对照管均抗补体，全部测定管皆为0，报告阴性