简介:B淋巴细胞与抗体合成有关,是体液免疫反应的效应细胞。B细胞表面带...[展开]
简介:B淋巴细胞与抗体合成有关,是体液免疫反应的效应细胞。B细胞表面带有膜表面免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体及补体受体等。它可与抗原抗体复合物的Fc段牢固结合。选用鸡或羊红细胞,用相应的抗红细胞抗体致敏成EA复合物,B细胞的Fc受体能与EA结合形成花环,称EA花环。如果EA复合物再加上补体,与B细胞的补体受体结合,则形成EAC花环。B细胞表面有鼠RBC受体,能与小鼠RBC结合,形成鼠红细胞花环(M-RFC),主要结合于带有IgM受体的B细胞上,形成M-RFC的多为幼稚B细胞。本试验临床上主要用于检测B淋巴细胞的数量及判断体液免疫水平。[收起]
鼠红细胞花环形成试验作用为检测B淋巴细胞的数量及判断体液免疫水平。慢性淋巴细胞白血病患者外周血液的ME花环百分率高达60%-80%,而无丙种球蛋白血症、严重联合型免疫缺陷等,ME花环百分率减低或缺如。
(1)取1ml上述小鼠红细胞悬液,加3ml生理盐水混匀,1500r/min,离心10min,共洗3次,最后用生理盐水配成1%小鼠红细胞悬液(约1.4×108个细胞/ml)。
(2)取受检者1.5ml肝素抗凝血,用淋巴细胞分层液分离淋巴细胞,用含20%小牛血清Hank液调整细胞浓度为2×107/ml。
(3)取淋巴细胞悬液0.1ml,加等量1%小鼠红细胞悬液,混合后置37℃水浴10min,500r/min,离心10min,放4℃冰箱2~3h。
(4)用毛细管吸取0.05ml上清液,加1滴2g/L美蓝溶液,轻轻旋转使混匀,取1滴混合物放在玻片上,覆以盖玻片,待细胞下沉后,用高倍镜检查