（1）标准曲线制作：分别为0，10，20，50，100，200，400pg（复管），60℃水浴压缩空气吹干，加补孕酮11000dpm/20μl吹干，各管加1∶5万0.2ml抗体，4℃恒温过夜，次日加5g/LGPS0.1ml，2.5g/LDCC0.5ml，4℃放置10min，3000r/min离心10min吸出上清液0.4ml，加到8ml闪烁液中，混旋1min，避光放4h后用液烁仪测量。另取四管，各加3H-孕酮11000dpm/20μl，吹干，加1g/L，GPS其中二管作总脉冲（T）。另二管作非特异性测定管（BN%），BN%DCC分离法同标准曲线制作。

（2）未知样品的检测：孕妇取血浆0.05ml或0.1ml，未孕妇或男性取0.2ml，于具塞试管中用重蒸馏水补足剂0.5ml，加0.1mol/LNaOH0.2ml，重蒸二氯甲烷5ml，抽提5min，静置，弃去上层液，二氯甲烷用蒸馏水洗2次，每次1ml，清洗，1500r/min离心3min，吸取二氯甲烷抽提液双份1ml，置45℃水浴蒸干，加3H-孕酮11000dpm/10μl，吹干，加1∶5万抗体0.2ml，以下操作与标准曲线相同。