简介:抗SS-B(La)的靶抗原为RNA多聚酶Ⅲ的辅助蛋白(48×103)。La蛋白的分子生...[展开]
简介:抗SS-B(La)的靶抗原为RNA多聚酶Ⅲ的辅助蛋白(48×103)。La蛋白的分子生物学性质已被阐明。RNA多聚酶的转录单位还包括核糖核酸蛋白颗粒组分小hY-RNAs,后者也被抗SS-A(Ro)识别。因此,至少从目前看来,Ro蛋白和La蛋白是细胞内的相同成分,或核糖核酸蛋白颗粒的部分相同成分。这可能就是即使Ro和La不存在可能发生交叉反应的同种序列,通常仍能在病人血清中同时查及的原因。[收起]
抗SS-B(La)抗体对干燥综合征等自身免疫疾病的诊断有作用。40%-90%原发性干燥综合征患者。约75%先天性心脏病和新生儿狼疮患者。抗SS-A阳性/抗SS-B阴性患者相比,抗SS-A和抗SS-B阳性的SLE患者,较少肾脏损伤,抗dsDNA也较少阳性,这种抗体模式也常在迟发性SLE患者中见到。
1、用间接免疫荧光法检测时,抗SS-A/Ro、抗SS-B/La阳性结果表现为核的细斑点型免疫荧光,但抗SS-A/Ro引起的荧光亮度较弱。其操作与原理均与抗核抗体检测相同。双向免疫扩散法仍为抗SS-A/Ro、抗SS-B/La的常用检测方法,但敏感性不高。
2、目前常用免疫印迹法,其原理可参看抗Sm抗体测定。最近也有人用基因重组的52kD和60kD蛋白质建立ELISA法测定抗SSA/Ro抗体,用重组48kD蛋白质建立ELISA法测抗SS-A/La抗体,其敏感性较之免疫扩散法约高千倍,但因特异性问题(重组抗原中常含有细菌产物)未广泛应用。一种敏感性和特异性都很高的方法是放射免疫沉淀法,此法是用放射性36S-蛋氨酸或32P-正磷酸盐标记组织培养细胞,标记上36S的代表所有蛋白质,标记上32P的代表磷酸化蛋白。
2、细胞内RNAs也标记上32P。将待测血清与标记上放射性核素的组织细胞提取物混合,抗体与标记抗原反应,形成免疫复合物,用葡萄球菌A蛋白使免疫复合物沉淀,溶解后行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射自显影,与自身抗体结合的放射性标记核抗原形成的条带即可显现出来,参照标准品形成的条带进行分析,即可做出诊断。此法目前还只限于实验室研究