简介：抗SS-A(Ro)识别的表位位于细胞内与小核糖核酸hY1、hY3、hY4、hY5形成复合...[展开]
简介：抗SS-A(Ro)识别的表位位于细胞内与小核糖核酸hY1、hY3、hY4、hY5形成复合物的两种蛋白质(60×103和52×103)上。这种核糖核酸蛋白颗粒的功能目前还未知，患者血清内的自身抗体可能针对其中一种，或者更常见的是同时针对两种蛋白复合物。从分子生物学观点看，两种蛋白及它们基因高度保守，有特征性重复，两者间并无密切联系。因此，同时出现抗两种蛋白的抗体并非由于交叉反应。[收起]
抗SS-A(Ro)抗体对干燥综合征等自身免疫疾病的诊断有作用。40%-90%原发性干燥综合征患者。约75%先天性心脏病和新生儿狼疮患者。抗SS-A阳性/抗SS-B阴性患者相比，抗SS-A和抗SS-B阳性的SLE患者，较少肾脏损伤，抗dsDNA也较少阳性，这种抗体模式也常在迟发性SLE患者中见到。
抗SS-A（Ro）抗体的测定原理：用间接免疫荧光法检测时，抗SS-A/Ro、抗SS-B/La阳性结果表现为核的细斑点型免疫荧光，但抗SS-A/Ro引起的荧光亮度较弱。其操作与原理均与抗核抗体检测相同。双向免疫扩散法仍为抗SS-A/Ro、抗SS-B/La的常用检测方法，但敏感性不高。目前常用免疫印迹法，其原理可参看抗Sm抗体测定。最近也有人用基因重组的52kD和60kD蛋白质建立ELISA法测定抗SSA/Ro抗体，用重组48kD蛋白质建立ELISA法测抗SS-A/La抗体，其敏感性较之免疫扩散法约高千倍，但因特异性问题（重组抗原中常含有细菌产物）未广泛应用。一种敏感性和特异性都很高的方法是放射免疫沉淀法，此法是用放射性36S-蛋氨酸或32P-正磷酸盐标记组织培养细胞，标记上36S的代表所有蛋白质，标记上32P的代表磷酸化蛋白，此外，细胞内RNAs也标记上32P。将待测血清与标记上放射性核素的组织细胞提取物混合，抗体与标记抗原反应，形成免疫复合物，用葡萄球菌A蛋白使免疫复合物沉淀，溶解后行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射自显影，与自身抗体结合的放射性标记核抗原形成的条带即可显现出来，参照标准品形成的条带进行分析，即可做出诊断。此法目前还只限于实验室研究。
试剂：血清 1ml。
操作方法：
（1）沉淀法：与抗Sm、抗RNP或抗SS-B等类似的检测方法不同，小牛、兔、胸腺提取物由于没有足够浓度的Ro抗原，不能用于免疫双扩散和反相免疫电泳，而主要从人脾组织或人培养细胞（WI-L2）获得。沉淀带与参考血清相同，核实为SS-A特异性。
（2）免疫印迹法：抗原采用细胞培养物如HeLa、MolT-4。当与参考血清有两条相同典型带（60×103和52×102）时，可确证为抗SSA（Ro）阳性。
（3）ELISA：可用亲和纯化或重组52×103和60×103蛋白，或相对纯化的hY-RNP颗粒作抗原。