简介:HLA即人类白细胞抗原(Human leucocyteantigen),是人类的组织相容性系统。这...[展开]
简介:HLA即人类白细胞抗原(Human leucocyteantigen),是人类的组织相容性系统。这是一组广泛分布于人体有核细胞表面的抗原,受控于人类第6号染色体短臂。HLA基因位点至少有五个,即HLA-A、B、C、D和DR位点。近年又确定了DP和DQ两个位点。HLA有高度多态性,每个位点至少有两个以上的等位基因。因此,在人群中可以查出一系列由一个位点决定的抗原特异性。因此,临床上器官移植,除同卵双生外,供者与受者除应ABO血型相配外,还需进行严格的HLA定型,以选择HLA相同或近似的个体。[收起]
HLA定型作用为选择HLA相同或近似的个体。意义是为组织或器官移植配型选择HLA适合的供体。
(1)取肝素抗凝血3~5ml,用分层液分离白细胞,用Hank液洗两次,计数后用细胞培养液配成8×107细胞/ml。
(2)将白细胞悬液分装于毛细管中,方法同前。每3ml血可分装8~10只毛细管。装入各毛细管中的淋巴细胞液要求相等。用火焰将毛细管一端封闭,置水平离心机内离心1000r/min,10min。离心后细胞被压紧呈4~6mm高,表层发自主要是白细胞,下层发红为红白细胞混杂。在细胞与液体交界处锯断毛细管用少量凡士林将封闭端黏在培养小室底层,每个小室可放1~2只毛细管。
(3)每3~4只毛细管分为一组,其中一组小室中加满培养液,另一组或几组小室中加满含有一定浓度抗原的培养液(注意勿使毛细管和培养小室中留有气泡)。小室用盖玻片封闭,置水平位于37℃孵育24h,同上法测量毛细管中白细胞移动面积,试验结果用移动指数(MI)表示