简介:丁型肝炎病毒抗原存在于受感染的细胞内和外周。丁型肝炎病毒急性感...[展开]
简介:丁型肝炎病毒抗原存在于受感染的细胞内和外周。丁型肝炎病毒急性感染早期,于乙型肝炎病毒表面抗原阳性期内可在血液中检出丁型肝炎病毒抗原,持续1~2周;慢性感染时可持续保持于低滴度水平。[收起]
丁型肝炎抗原对丁型肝炎的诊断有参考价值。丁型肝炎病毒抗原,存在受感染的肝组织细胞内,外周血的完整病毒内,患者外周血中HDAG阳性表明体内有丁肝病毒复制,血中有丁型肝炎病毒。
(1)取包被液稀释抗-HDV IgG包被聚苯乙烯板,每孔100μl放37℃1h,4℃过夜。
(2)洗3次后,每孔分别加入待检血清和阴、阳性对照血清50μl(阴性对照血清孔,阳性对照血清2孔)和10%Tween20 50μl,充分混合均匀后放室温过夜,使之裂解丁肝病毒表面包裹的HBsAg释放丁肝抗原。
(3)洗3次后,每孔加入50μl HRP-抗HDV抗体(稀释液中除含10%小牛血清外还含有10个ELISA单位的抗HBc单克隆抗体),放45℃1h(或37℃2h)。
(4)洗3次后,每孔加50μl新鲜配制的底物液,放室温暗处显色15~30min后每孔加25μl 2mol/L H2SO4终止反应