简介：5-HT又称血清素(serotonin)，由色氨酸衍生，色氨酸经色氨酸羟化酶作用形...[展开]
简介：5-HT又称血清素(serotonin)，由色氨酸衍生，色氨酸经色氨酸羟化酶作用形成5-羟色氨酸，再经脱羧酶成为5-HT。5-HT是中枢神经系统的传递物质，其活性部分是吲哚胺。它广泛存在于脑、血小板、胃等组织中，以脑中的含量最大，是较强的平滑肌刺激和血管收缩剂。它在血小板中含量较高，血小板破裂释放后参与血管收缩等效益。2/3的5-HT在肝脏与硫酸或葡萄糖醛酸结合后排出，或将吲哚断裂而分解;约1/3经单氨氧化酶作用氧化脱氨形成5-HLAA后从尿排出。5-HIAA是5-羟色氨酸代谢的最终产物，不具有生物活性。[收起]
5-羟色胺对癌症及中枢神经系统疾病的诊断有重要价值。升高见于类癌瘤综合征、术后倾倒综合征、偏头痛、低氧症等。降低监狱系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(风湿性关节炎)、混合性结缔组织病等结缔组织疾病、帕金森病(震颤性麻痹)、舞蹈病、肝豆状核变性(Wilson病)、精神分裂症、神经衰弱等。
(1)膜受体制备：①脑匀浆：大鼠或小鼠断头放血，将头剪下置冰浴中，并用骨剪剪开头颅立即取出大脑，除去包膜及残血，剪碎后加入相当重量20倍体积的预冷的溶液①，用内切式高速分散器匀浆10000r/min，1min，再用超声波粉碎器匀浆60s。全部过程在冰浴中进行。②离心：脑匀浆在1000×g离心10min，除去细胞核及致密物质，用滴管小心地将上清液移至另一离心管中，再用50000×g离心10min，弃去上清液，沉淀物再用溶液①洗涤离心2次。最后所得的沉淀物为含受体的细胞膜碎片。全部操作都在0～4℃进行。③悬液：沉淀物用溶液②悬浮，再用超声波粉碎器匀浆60s。然后用溶液②配成每毫升悬浮液中含脑组织湿重11.76mg。取0.2ml按lowry法测定其蛋白含量。放冰浴中备用。
(2)结合反应反应总体积为2ml，试管分二部分，一部分为总结合反应管，另一部分非特异性结合反应管。