简介:血浆凝血酶调节蛋白活性测定是对人体内的血浆凝血酶调节蛋白进行活...[展开]
简介:血浆凝血酶调节蛋白活性测定是对人体内的血浆凝血酶调节蛋白进行活性测定,诊断是否缺失。凝血酶调节蛋白又称血栓调节蛋白,是维持血管内膜完整的内皮细胞表面分子,也是由血管内皮细胞表达的凝血酶(thrombin)受体之一。[收起]
血浆凝血酶调节蛋白活性测定是对人体内的血浆凝血酶调节蛋白进行活性测定,诊断是否缺失。
将收集到的血浆按1~5编号,各均分为2份,其中1份采用等电点沉淀法提取凝血酶原,另1份采用柠檬酸钡吸附法提取凝血酶原。
1 等电点沉淀法 血浆用蒸馏水稀释10倍,用5 %冰乙酸将其pH调至5.3,4℃静置过夜,3 000 r/min离心15 min,弃上清,沉淀用生理盐水溶解,过滤备用。
2 柠檬酸钡吸附法 血浆中加入溶液A,体积比为10∶1,4℃搅拌30 min,静置30 min后,3 000 r/min离心30 min,弃上清。
3沉淀用溶液B洗涤,3 000 r/min离心15 min,弃上清。重复洗3次。
4沉淀用溶液C解吸附,4℃搅拌0.5~1h,3 000 r/min离心15 min取上清。上清液用溶液D于4℃透析过夜。
3 000 r/min离心15 min取上清液,即为凝血酶原溶液。